肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉CistanchedeserticolaY.C.Ma或管花肉苁蓉Cistanchetubulosa（Schenk）R.Wight干燥的离交带鳞叶的肉质茎，其具有补肾阳，换树益精血，脂对润肠通便的肉苁蓉总作用，常用于肾阳不足，寡糖工艺精血亏虚，脱盐脱色阳痿不孕，研究腰膝酸软，离交筋骨无力，换树肠燥便秘等症状。脂对随着中国人口的肉苁蓉总老龄化及现代生活压力的不断增加，便秘的寡糖工艺患病率有逐渐升高之势。肉苁蓉作为中国传统的脱盐脱色润肠通便类中药越来越受到重视，有研究表明，研究肉苁蓉通便作用的离交药效物质是总寡糖（包括寡糖和半乳糖醇）。肉苁蓉经过水提、浓缩、醇沉之后，浓缩上清液经大孔树脂纯化，其水洗脱液部分经过减压浓缩至稠膏，即得肉苁蓉总寡糖。由于肉苁蓉一般生长在盐渍化的松软沙地上，导致其药材本身的盐分含量高，而通过上述工艺制备得到的肉苁蓉总寡糖含有大量的金属盐离子及色素。若想从肉苁蓉寡糖部位中提纯肉苁蓉寡糖，开发治疗便秘的相关药物及保健食品，则必须对肉苁蓉寡糖部位进行脱盐脱色处理。由于肉苁蓉寡糖和半乳糖醇分子量十分小，水溶性极强，难以应用凝胶树脂进行脱盐处理。而大孔树脂具有强吸附能力、易洗脱、机械强度高等优点，利用大孔离子交换树脂可以和溶液中阴阳离子交换，脱除溶液中的盐类，而大孔树脂的强吸附能力可以用于色素脱除。
本文从肉苁蓉总寡糖部位中提纯肉苁蓉总寡糖，采用阴阳离子交换树脂串联法对肉苁蓉总寡糖部位进行了脱盐脱色，根据不同离子交换树脂对提取液脱色脱盐的静态吸附，确定脱色脱盐最佳树脂组，然后对最佳阴阳离子交换树脂组合进行脱色脱盐工艺优化，确定最佳工艺条件，为肉苁蓉寡糖脱色脱盐工艺提供一定的理论基础。
一、材料与仪器
肉苁蓉饮片购自安徽新盛中药饮片有限公司，经赵奎君教授鉴定为荒漠肉苁蓉CistanchedeserticolaY.C.Ma的干燥带鳞叶的肉质茎；AB-8大孔树脂、LS-840树脂、LS--850树脂，西安蓝深树脂有限公司；半乳糖醇对照品由北京大学中医药现代化研究中心提供，经HPLC-ELSD检测确定纯度大于98%。
UV-2001紫外可见分光光度计（日本岛津）；FE20pH计（Mettler—Toledo）；DDS-307型电导率仪（上海光学仪器厂）；DDB-320多功能蠕动泵（上海之信仪器有限公司）；Waters600高效液相色谱仪；N-1001旋转蒸发仪（EYELA）。
二、方法
1、肉苁蓉总寡糖的制备
取肉苁蓉药材2kg，加8倍量水加热回流提取2次，每次2h，合并滤液，减压浓缩至相对密度达1.13（600C测定），加95%乙醇至含醇量达60%，静置过夜，滤过，滤液减压浓缩至1.15（50C测定），在经AB-8大孔树脂纯化，用水洗脱，收集水洗脱液，减压浓缩至稠膏即得肉苁蓉总寡糖部位。
2、阴阳离子交换树脂的筛选
（1）树脂的处理
LS-840树脂处理：树脂用水浸洗，湿法装柱（2.6cmx30cm），先用3BV的去离子水以1BV/h的流速冲洗树脂层，再用3BV的4%盐酸处理，以相同流速冲洗树脂层，结束后用纯水清洗树脂至pH至中性，待用。
LS-850树脂处理：树脂用水浸洗，然后湿法装柱（2.6cmx30cm），先用3BV的去离子水以1BV/h的流速清洗树脂，再用3BV的4%氢氧化钠溶液，以相同流速冲洗树脂层，结束后用纯水清洗树脂至pH至中性，待用。
（2）树脂对肉苁蓉总寡糖脱盐、脱色动态吸附试验
将LS-840酸性阳离子交换树脂和LS-850碱性阴离子交换树脂按照体积比2∶1、1.5∶1、1.2∶1、1∶1、0.8∶1的顺序装柱，按照LS-840树脂LS-850树脂的顺序串联。取100mL肉苁蓉寡糖部位液体上柱，控制流速在2BV/h，等流出液糖度大于0之后，收集洗脱液，计算脱盐率和脱色。
（3）流速对脱盐脱色的影响
将LS-840酸性阳离子树脂和LS--850碱性阴离子交换树脂按照体积比1.2∶1串联装柱，取300mL体积分数10%的肉苁蓉总寡糖部位上柱，控制不同流速1BV/h、2BV/h、4BV/h，等流出液糖度大于0之后，每隔30min收集1管，测定每管的电导率及吸光度。
（4）料液浓度对脱盐脱色的影响
将LS--840酸性阳离子交换树脂与LS-850碱性阴离子树脂交换按照体积比1.2∶1串联装柱，分别取料液浓度5%、10%、15%、20%、25%的肉苁蓉总寡糖部位100mL上柱，控制流速在2BV/h，等流出液糖度大于0之后，收集洗脱液，测定洗脱液的电导率和吸光度。
3、树脂的再生
LS--840大孔树脂选择1mo/L的盐酸溶液50mL作为解吸剂，LS--850大孔树脂选择lmol/L的氢氧化钠作为解吸剂。LS-840酸性阳离子交换树脂与LS-850碱性阴离子交换树脂柱体积比为1.2∶1，流速为2BV/h，肉苁蓉总寡糖部位的浓度为10%。在此条件下，处理4BV的肉苁蓉总寡糖，比较不同使用次数下的糖液脱盐率及脱色率的变化，观察树脂连续使用9次的动态再生情况。
4、测定方法
（1）总糖的测定
利用硫酸一苯酚法，以葡萄糖为对照对肉苁蓉总寡糖部位进行总糖测定，采用HPLC-ELSD方法对该部位的半乳糖醇进行了含量测定。HPLC-ELSD色谱条件：色谱柱，AlltechPevailCarbohydrateES（4.6mmx250mm，5μm）；流动相，乙腈-水（体积比为80∶20）；保留时间，30min；ELSD检测器漂流管温度为800C，载气流速为3.0L/min。
（2）灰分的测定
灰分含量测定采用GB5009.4-2001方法。
（3）脱盐率的测定
式中：Ko为肉苁蓉总寡糖部位经树脂处理前的电导率，mS/cm；
K1为每管流出液的电导率，mS/cm。
（4）脱色率的测定；
式中：Ao为肉苁蓉总寡糖部位经树脂处理前的吸光度，A为每管流出液的吸光度。
三、结果与讨论
1、肉苁蓉总寡糖部位的成分
分析由表1可知，肉苁蓉总寡糖部位含总糖69.42%，其中半乳糖醇含量为肉苁蓉总寡糖部位的27.75%，总糖中含将近一半的半乳糖醇。由表1可知，肉苁蓉总寡糖部位中含有大量的盐分，导致灰分占肉苁蓉总寡糖部位有20%左右，严重影响了肉苁蓉总寡糖的进上步开发利用。
2、阴阳离子交换树脂的筛选
（1）阴阳离子树脂柱体积比对脱盐脱色的影响
由图1可知阴阳离子树脂比在1.2∶1时脱盐效果最好，同时也说明了肉苁蓉总寡糖部位中盐类主要以弱碱性阴离子形式存在。树脂比例对脱色效果影响较小，阴阳树脂比在2∶1至1∶1时，脱色率变化范围很小，当树脂比小于1：1时，脱色效果明显减弱。综合考虑，为了获得一个较好的脱色脱盐效果，选用最佳柱体积比为1.2∶1。
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(责任编辑：焦点)
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